Receptor Binding Techniques

تعریف گسترده‌ای از گیرنده، پروتئین تخصصی روی یا درون یک سلول است که لیگاند خاصی را شناسایی کرده و به آن متصل می‌کند تا تحت یک تغییر ساختاری قرار گیرد، که منجر به پاسخ فیزیولوژیکی یا تغییر در عملکرد سلول می‌شود. یک لیگاند می تواند یک انتقال دهنده عصبی درون زا، هورمون، فاکتور پاراکرین/خودوکرین یا یک داروی مصنوعی باشد که ممکن است به عنوان آگونیست یا آنتاگونیست عمل کند. ویرایش سوم تکنیک‌های اتصال گیرنده بر روش‌ها و تکنیک‌های مورد استفاده برای مطالعه گیرنده‌ها در سیلیکو، آزمایشگاهی و درون تنی می‌پردازد. فصل‌های جامع نحوه استفاده از منابع آنلاین برای تحقیقات تجربی مانند پیش‌بینی برهم‌کنش‌های گیرنده-لیگاند و استخراج پایگاه داده گیرنده IUPHAR را شرح می‌دهند. تکنیک های کلاسیک اتصال رادیو لیگاند، اتورادیوگرافی کمی و تجزیه و تحلیل آنها با استفاده از ایمونوسیتوشیمی برای مکان یابی سلولی پروتئین گیرنده و هیبریداسیون برای تشخیص mRNA گیرنده تکمیل می شود. پروتکل‌هایی با استفاده از لیگاندهای برچسب‌دار فلورسنت برای تجسم گیرنده‌ها در سلول‌های زنده، تعامل آنها با بتا آرستین برای اندازه‌گیری درونی‌سازی ناشی از لیگاند و پروتئین فلورسنت سبز برای مطالعه قاچاق توصیف شده‌اند. سنجش‌های غیر رادیواکتیو، cAMP و آرستین، شناسایی «آگونیست‌های مغرضانه» جدید را تسهیل می‌کنند. روش های دقیق برای تصویربرداری in vivo از گیرنده ها با استفاده از توموگرافی انتشار پوزیترون (PET) ارائه شده است.

نوشته شده در قالب بسیار موفق Methods in Molecular Biology™، فصل‌ها شامل مقدمه‌ای بر موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، گام به گام و به آسانی است. پروتکل های آزمایشگاهی قابل تکرار و نکات کلیدی در مورد عیب یابی و اجتناب از دام های شناخته شده. معتبر و کاربردی، تکنیک های اتصال گیرنده، ویرایش سوم، به دانشمندان در ادامه مطالعه اتصال گیرنده کمک می کند.

A broad definition of a receptor is a specialized protein on or in a cell that recognizes and binds a specific ligand to undergo a conformational change, leading to a physiological response or change in cell function. A ligand can be an endogenous neurotransmitter, hormone, paracrine/autocrine factor, or a synthetic drug that may function as an agonist or antagonist. The third edition of Receptor Binding Techniques expands upon the methods and techniques used for studying receptors in silico, in vitro and in vivo. Comprehensive chapters describe how to use online resources for experimental research such as prediction of receptor-ligand interactions and mine the IUPHAR receptor database. Classical techniques of radioligand binding, quantitative autoradiography and their analyses are complemented by the use of immunocytochemistry for the cellular localization of receptor protein and hybridization to detect receptor mRNA. Protocols using fluorescent labeled ligands are described to visualise receptors in living cells, their interaction with beta-arrestin to measure ligand-induced internalisation and green fluorescent protein to study trafficking. Non-radioactive, chemiluminescent cAMP and arrestin assays facilitate the identification of novel ‘biased agonists’. Detailed methods are provided for in vivo imaging of receptors using positron emission tomography (PET).

Written in the highly successful Methods in Molecular Biology™ series format, chapters include introductions to their respective topics, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step, readily reproducible laboratory protocols, and key tips on troubleshooting and avoiding known pitfalls. Authoritative and practical, Receptor Binding Techniques, Third Edition, aids scientists in continuing to study receptor binding.