Yeast Genetics: A Manual of Methods

راهنما از دو بخش اصلی تشکیل شده است. اولین مورد شامل روشهای ضروری، گاهی اوقات پر زحمت، برای دست زدن به مخمرها، برای القای جفت گیری و جداسازی هیبریدها، برای القای هاگ و جداسازی کلون های تک اسپور، با برخی جزئیات تجزیه و تحلیل تتراد، و شامل تکنیک ها و تجهیزات جانبی برای استفاده از میکرومانیپولاتور همچنین مراحلی برای القای جهش‌یافته‌ها توسط عوامل فیزیکی و شیمیایی، و جداسازی انواع خاصی از جهش‌یافته‌ها، مانند حساسیت به دما، افزایش فراوانی جهش‌ها، برای جهش در ژنوم میتوکندری، هر دو به شکل کلنی کوچک وجود دارد. و مقاومت در برابر آنتی بیوتیک ها، برای جهش در آن قسمت از ژنوم مخمر که چرخه گلیکولیتیک را کنترل می کند، و بسیاری دیگر. نقشه برداری از جهش ها به طور خلاصه مورد بحث قرار می گیرد، اگرچه این جنبه از ژنتیک مخمر احتمالاً جنبه ای است که تا زمانی که محقق مقدار مشخصی از تجربه را در این زمینه به دست نیاورده است، نباید انجام شود. با این حال، همانطور که در بخش مربوطه کتابچه راهنما اشاره شده است، کار نقشه برداری با در دسترس بودن مرکز سهام ژنتیک مخمر در دانشگاه کالیفرنیا در برکلی مجموعه ای از سویه های کمکی تروفیک طراحی شده برای اجازه نقشه برداری بسیار ساده شده است. ناشناخته ترین ژن ها با حداقل تعداد تلاقی و تجزیه و تحلیل تتراد. بخش اول با شرح روش‌های هیبریداسیون مخمرها با همجوشی پروتوپلاست به پایان می‌رسد که به عنوان سیستم انسان فقیر برای مهندسی ژنتیک توصیف شده است.

The manual consists of two main sections. The first includes the essential, sometimes laborious, procedures for handling yeasts, for inducing mating and isolation of hybrids, for inducing sporulation and isolation of single-spore clones, with some details of tetrad analysis, and including techniques and ancillary equipment for use of the micromanipulator. There are also proce­ dures for induction of mutants by physical and chemical agents, and for iso­ lation of particular types of mutants, such as to temperature sensitivity, for increased frequency of mutations, for mutations in the mitochondrial genome, both to the petite colonie form and to resistance to antibiotics, for mutations in that part of the yeast genome controlling the glycolytic cycle, and numerous others. Mapping of mutations is discussed briefly, though this aspect of yeast genetics is probably one which should not be undertaken until the investigator has gained a certain amount of experience in the field. How­ ever, as is pointed out in the pertinent part of the manual, the task of mapping has been tremendouslysimplified by the availability from the Yeast Genetics Stock Center at the University of California at Berkeley of a set of auxo­ trophic strains designed to permit mapping of most unknown genes with a minimum number of crosses and tetrad analyses. The first section concludes with the description of methods for hybridization of yeasts by protoplast fusion, which has been described as the poor man's system for genetic engineering.