The Genetic Manipulation of Staphylococci: Methods and Protocols

این کتاب مفصل شامل فصل‌هایی با استفاده از رویکردهای بی‌طرفانه مانند جهش‌زایی شیمیایی و ترانسپوزون، و همچنین پروتکلی برای تبادل آللی، برای ساختن جهش‌یافته‌های هدفمند در استافیلوکوک، به عنوان جهش‌یافته این باکتری است. بسته به تغییرات مورد نظر می توان به روش های مختلفی انجام داد. با استفاده از این روش‌ها، نویسندگان در ساخت جهش‌هایی که تغییرات تک نوکلئوتیدی منفرد در کروموزوم تا کل کتابخانه‌های جهش یافته ژنوم را در بر می‌گیرند موفق بوده‌اند. استراتژی دوم ابزار مفیدی برای غربالگری با توان بالا فراهم می‌کند، در حالی که تغییرات تک نوکلئوتیدی روشی زیبا برای تشخیص اهمیت تک نوکلئوتیدها در بیان ژن یا ایجاد جایگزین‌های اسید آمینه خاص برای بررسی عملکرد پروتئین است. که برای مجموعه روش‌ها در زیست‌شناسی مولکولی نوشته شده است، فصل‌ها شامل مقدمه‌ای بر موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، پروتکل‌های آزمایشگاهی گام به گام و به آسانی قابل تکرار و نکاتی در مورد عیب‌یابی و اجتناب از شناخته شده است. مشکلات.

عملی و معتبر، دستکاری ژنتیکی استافیلوکوک ها: روش ها و پروتکل ها به عنوان یک منبع و راهنمای حیاتی برای دانشمندان در جامعه استافیلوکوک ها که مطالعات خود را بر روی این باکتری ها دنبال می کنند، عمل می کند. .

This detailed book contains chapters using unbiased approaches such as chemical and transposon mutagenesis, as well as a protocol for allelic exchange, to make targeted mutants in Staphylococcus, as generating mutants of this bacteria can be accomplished in many ways, depending on the intended changes. Using these methods, the authors have been successful at making mutants that span individual single-nucleotide changes in the chromosome to whole genome mutant libraries. The latter strategy provides a useful tool for high-throughput screening, while single nucleotide changes are an elegant way of teasing apart the importance of single nucleotides in gene expression or to create specific amino acid substitutions to examine protein function. Written for the Methods in Molecular Biology series, chapters include introductions to their respective topics, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step, readily reproducible laboratory protocols, and tips on troubleshooting and avoiding known pitfalls.

Practical and authoritative, The Genetic Manipulation of Staphylococci: Methods and Protocols serves as a vital resource and guide to scientists in the Staphylococcus community as they pursue their studies on these bacteria.