RNAi and microRNA-Mediated Gene Regulation in Stem Cells: Methods, Protocols, and Applications

تحقیقات اخیر سلول های بنیادی نشان داده است که تنظیم ژن با واسطه miRNA و RNAi یکی از عوامل تعیین کننده حیاتی برای کنترل وضعیت تمایز سلولی است و RNA های کوچک به عنوان عناصر کلیدی در کنترل شبکه تنظیمی تعیین سرنوشت سلول پرتوان نقش دارند. در RNAi و تنظیم ژن با واسطه microRNA در سلول‌های بنیادی: روش‌ها، پروتکل‌ها و کاربردها، نویسندگان متخصص از آزمایشگاه‌های سراسر جهان مجموعه‌ای در دسترس از روش‌های به‌روز و اثبات‌شده را با تمرکز بر مطالعه موضوع عنوان ارائه می‌کنند. این کتاب که به سه بخش تقسیم شده است، ابتدا با تمرکز بر وضعیت فعلی تحقیقات و چشم اندازهای آینده، معرفی مختصری از RNAi و miRNA ها در سلول های بنیادی ارائه می دهد، سپس با روش ها و پروتکل های دقیق برای غربالگری RNAi، ترانسفکشن و نابودی ادامه می دهد. ژن‌ها و مسیرهای خاص در چندین گونه جانوری، از جمله انسان و موش، نتیجه‌گیری با بخشی از روش‌های اخیراً توسعه‌یافته برای شناسایی miRNA‌ها، از جمله یک پروتکل کلی برای آماده‌سازی و تجزیه و تحلیل کتابخانه‌های miRNA برای توالی‌یابی عمیق، حذف یک ژن خاص با استفاده از shRNA مبتنی بر miRNA و تجزیه و تحلیل بیان miRNA با استفاده از qRT-PCR. این فصل‌ها که با فرمت‌های بسیار موفق سری Methods in Molecular Biology™ نوشته شده‌اند، حاوی مقدمه‌ای بر موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، پروتکل‌های آزمایشگاهی گام به گام و به‌راحتی قابل تکرار، و نکات برجسته‌کننده نکاتی در مورد عیب‌یابی و اجتناب از مشکلات شناخته‌شده هستند. . مقررات ژنی معتبر و پیشرفته با واسطه RNAi و microRNA در سلول های بنیادی: روش ها، پروتکل ها و کاربردها به عنوان یک منبع ارزشمند برای دانشمندان و دانشجویان فارغ التحصیل مشتاق علاقه مند به تقاطع RNAi، miRNA، و زیست شناسی مولکولی سلول های بنیادی و زمینه های هیجان انگیز پزشکی، از جمله پزشکی احیا کننده، پیری، سرطان، و اختلالات عصبی، که می توانند از طریق این حوزه تحقیقاتی در حال گسترش پیشرفت کنند.

Recent stem cell research has revealed that miRNA and RNAi-mediated gene regulation is one of the vital determinates controlling the state of cell differentiation, with the small RNAs serving as key elements involved in regulatory network control of pluripotent cell fate determination. In RNAi and microRNA-Mediated Gene Regulation in Stem Cells: Methods, Protocols, and Applications, expert authors from laboratories across the globe contribute an accessible compendium of up-to-date, proven methods focused on the study of the titular topic. Divided into three sections, the book first gives a brief introduction to RNAi and miRNAs in stem cells, with a focus on the current status of research and future perspectives, then it continues with detailed methods and protocols for RNAi screening, transfection, and the knockdown of specific genes and pathways in several animal species, including humans and mice, concluding with a section on recently developed methods for identification of miRNAs, including a general protocol for preparation and analysis of miRNA libraries for deep sequencing, knock down of a specific gene using miRNA-based shRNA, and miRNA expression analysis using qRT-PCR. Written in the highly successful Methods in Molecular Biology™ series format, chapters contain introductions to their respective topics, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step, readily reproducible laboratory protocols, and notes highlighting tips on troubleshooting and avoiding known pitfalls. Authoritative and cutting-edge, RNAi and microRNA-Mediated Gene Regulation in Stem Cells: Methods, Protocols, and Applications serves as a valuable resource for scientists and aspiring graduate students interested in the intersection of RNAi, miRNA, and stem cell molecular biology and the exciting areas of medicine, including regenerative medicine, aging, cancer, and neurological disorders, that can be advanced through this expanding area of research.