Mycoplasma Infection of Cell Cultures

اگر کسی بخواهد مزاحم ایده آلی را برای کشت سلولی طراحی کند، نتیجه ممکن است شبیه مایکوپلاسما باشد. این میکروارگانیسم‌ها در طبیعت بسیار شایع هستند و در حفره دهان، خون، غشاهای مخاطی دستگاه تنفسی و دستگاه تناسلی ادراری و سایر بافت‌های انسان و حیوانات یافت می‌شوند. شناسایی آنها از نظر میکروبیولوژیکی و شیمیایی نسبتاً دشوار است. به دلیل نداشتن دیواره سلولی، به طور معمول در کشت سلولی کدورت تولید نمی کنند و در برابر آنتی بیوتیک هایی که روی دیواره سلولی اثر می کنند، مقاوم هستند. مایکوپلاسماها در کشت های سلولی به تیتر بالایی می رسند. Concen 7 8 تراسیون از 10-10 واحد تشکیل دهنده کلنی در هر میلی لیتر از محیط رویی نماینده است. علاوه بر این، تعداد بیشتری به غشای سلولی متصل می شوند. علاوه بر این، نشان داده شده است که مایکوپلاسماها اثرات آزمایشگاهی ویروس ها و مواد شیمیایی سمی را تقلید می کنند. در سیستم‌های مختلف کشت سلولی، مایکوپلاسماها باعث مرگ سلولی، کاهش یا افزایش رشد سلولی، تأثیر بر تیترهای ویروسی، القای اینترفرون، ایجاد آسیب کروموزومی، القای دگرگونی، اثرات سیتو پاتیک، تغییر بیان فنوتیپی و تغییر قابل توجه مسیرهای متابولیکی می‌شوند. و محصولات سلولی وجود چنین غلظت بالایی از مایکوپلاسما در کشت سلولی یک عفونت واقعی در شرایط آزمایشگاهی را تشکیل می دهد. چنین کشت های سلولی آلوده، با مجموع 89 10_10 مایکوپلاسما یا بیشتر متابولیزه کننده فعال، جایی در روش های کشت سلولی استاندارد و کنترل شده ندارند. گزارش‌های متعددی در مورد روش‌های سنجش مایکوپلاسما، اثرات عفونت، و اقدامات پیشگیرانه و حذفی منتشر شده است.

If one were to design the ideal nuisance for cell cultures, the resultant might well be similar to mycoplasmas. These micro­ organisms are very prevalent in nature, being found in the oral cavity, blood, the mucous membranes of the respiratory and uro­ genital tract and other tissues of both man and animals. They are relatively difficult to detect microbiologically and chemically. Lacking cell walls, they do not routinely produce turbidity in cell cultures and are resistant to antibiotics that act on cell walls. Mycoplasmas grow to high titers in cell cultures. Concen­ 7 8 trations of 10-10 colony forming units per ml of supernatant medium are representative. Additionally, more numbers are attached to cell membranes. Further, mycoplasmas have been shown to mimic in vitro effects of viruses and toxic chemicals. In various cell culture systems, mycoplasmas have been known to cause cell death, decrease or increase cell growth, affect virus tite~s, induce interferon, cause chromosome damage, induce transformation, cyto­ pathic effects, alter phenotypic expression, and significantly alter metabolic pathways and products of cells. The presence of such high concentrations of mycoplasmas in cell cultures constitutes a true in vitro infection. Such infected cell cultures, with a 8 9 total of 10 _10 or more actively metabolizing mycoplasmas, have no place in controlled, standardized cell culture procedures. Numerous reports have been published on mycoplasma assay pro­ cedures, effects of infection, and preventive and elimination measures.