Gentechnische Methoden: Eine Sammlung von Arbeitsanleitungen für das molekularbiologische Labor

روش های مهندسی ژنتیک خاصی که برای ارائه نتایج بسیار مورد نیاز طراحی شده اند چگونه کار می کنند؟ کدام روش برای آزمایش مناسب است؟ کدام کنترل ها منطقی هستند؟ دقیقاً چگونه یک بافر باید آماده شود و دوباره با ترتیب در طرح پیپتینگ چگونه بود؟ درویرایش پنجماین کتابچه راهنمای آزمایشگاهی آزموده شده، روش های بیولوژیکی مولکولی در قالب دستورالعمل های کاری واضح و قابل تکرار ارائه شده است تا بر موانع روزانه کارهای روزمره آزمایشگاهی مسلط شوید. این برای دانشجویان کارشناسی، کارشناسی ارشد یا دیپلم و همچنین دستیاران فنی است که می‌خواهند روش‌های جدید و دانشمندان با تجربه را برای مرجع سریع ایجاد کنند.

نویسندگان در تدریس و تحقیق یا در صنعت کار می‌کنند و در اینجا قبول می‌کنند. بر اساس دانش و سالها تجربه آزمایشگاهی آنها. بسیاری از روش ها و دستور العمل ها با موفقیت ایجاد شده اند، برخی دیگر به تازگی معرفی شده اند. در ابتدای هر بخش، خواننده با مهمترین مفاهیم آشنا می شود. این با یک بخش عملی همراه با دستورالعمل هایی همراه است که امکان یادگیری گام به گام و کاربرد دقیق روش ها را فراهم می کند. اهمیت ویژه‌ای به دستورالعمل‌های ایمنی و شناسایی منابع احتمالی خطا داده شد.

محتوا:

• 1 روش‌های عمومی
< li>2 الکتروفورز ژل
• 3 جداسازی DNA
• 4 واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)
• 5 شبیه سازی cDNA (بانک ژن cDNA)
• 6 شبیه سازی DNA ژنومی (بانک ژن ژنومی)
• 7 جداسازی و برچسب گذاری RNA
• تداخل RNA 8
• 9 آماده سازی بافت
• 10 تشخیص پروتئین و اسید نوکلئیک روی غشاء
• 11 هیبریداسیون درجا
• 12 انتقال سلول‌های پستانداران
• 13 روش‌های تبدیل برای قارچ‌های رشته‌ای
• li>
• 14 بیان ژن در E coli و سلول های حشرات: خالص سازی پروتئین های نوترکیب
• 15 سیستم بیان Pichia pastoris
• 16 کاهش بیان ژن از طریق هدف گیری ریبوزیم
• 17 تجزیه و تحلیل تنظیم ژن
• 18 آرایه پپتیدی بر روی غشاهای سلولزی
• 19 تجزیه و تحلیل بیان ژن با ریزآرایه s
• 20 پرسش های پایگاه داده مبتنی بر متن و توالی در بیوانفورماتیک
• پیوست 1 توالی یابی DNA
• پیوست 2 شناسایی و توالی یابی پروتئین

در 5. ویرایشعلاوه بر تجدید نظر در فصول پایه در مورد روش های بیولوژیکی مولکولی، فصل های مربوط به RNAi، بیوانفورماتیک و ریزآرایه ها به طور قابل توجهی گسترش یافته است. فصل جدیدی در مورد تثبیت و آماده سازی بافت اضافه شده است. این کتاب ابزاری ضروری برای هر آزمایشگاه بیولوژی مولکولی است.

Wie funktionieren bestimmte gentechnische Methoden, die dringend benötigte Ergebnisse liefern sollen? Welches Verfahren ist für ein Experiment am besten geeignet? Welche Kontrollen sind sinnvoll? Wie genau muss ein Puffer angesetzt werden und wie war das noch mal mit der Reihenfolge im Pipettierschema? In der 5. Auflage dieses bewährten Laborhandbuches werden molekularbiologische Methoden in Form von eindeutigen und reproduzierbaren Arbeitsvorschriften präsentiert, um die täglichen Hürden des Laboralltags zu meistern. Es richtet sich an Bachelor-, Master- oder Diplomstudierende sowie an Technische Assistenten, die neue Methoden etablieren wollen, und erfahrene Wissenschaftler zum schnellen Nachschlagen.

Die Autoren sind in Lehre und Forschung oder in der Industrie tätig und geben hier ihr Wissen und ihre jahrelange Laborerfahrung weiter. Die meisten Methoden und Rezepte sind erfolgreich etabliert, andere wurden erst aktuell eingeführt. Zu Beginn eines jeden Abschnitts wird der Leser über die wichtigsten Konzepte informiert. Es folgt ein praktischer Teil mit Arbeitsanleitungen, die Schritt für Schritt das Erlernen und genaue Anwenden der Methoden ermöglichen. Besonderer Wert wurde auf Sicherheitshinweise und das Aufzeigen möglicher Fehlerquellen gelegt.

Inhaltsübersicht:

• 1 Allgemeine Methoden
• 2 Gelelektrophoresen
• 3 Isolierung von DNA
• 4 Polymerase-Kettenreaktion (PCR)
• 5 Klonierung von cDNA (cDNA-Genbank)
• 6 Klonierung von genomischer DNA (genomische Genbank)
• 7 Isolierung und Markierung von RNA
• 8 RNA-Interference
• 9 Gewebepräparation
• 10 Detektion von Protein und Nucleinsäure auf Membran
• 11 In situ-Hybridisierung
• 12 Transfektion von Säugerzellen
• 13 Transformationsmethoden für filamentöse Pilze
• 14 Genexpression in E coli und Insektenzellen: Reinigung rekombinanter Proteine
• 15 Das Pichia pastoris-Expressionssystem
• 16 Verminderung der Genexpression über Ribozym-Targeting
• 17 Analyse der Genregulation
• 18 Peptidarrays auf Cellulosemembranen
• 19 Genexpressionsanalyse mit Microarrays
• 20 Text- und sequenzbasierte Datenbank-Abfragen in der Bioinformatik
• Anhang 1 Sequenzierung von DNA
• Anhang 2 Proteinidentifizierung und Sequenzierung

In der 5. Auflage wurden neben der Überarbeitung der grundlegenden Kapitel zu den molekularbiologischen Methoden die Kapitel zu RNAi, Bioinformatik und zu Microarrays deutlich ausgebaut. Ein Kapitel zur Fixierung und Aufbereitung von Gewebe ist neu hinzugekommen. Damit ist dieses Buch wiederum ein unverzichtbares Hilfsmittel für jedes molekularbiologische Labor.