Generation of cDNA Libraries: Methods and Protocols

با رمزگشایی ژنوم انسان و کاربرد بالقوه اطلاعات آن در تراشه‌های ژنی، توانایی تولید کتابخانه‌های cDNA برای سنجش عملکردی توالی‌های ژنی خاص در دستکاری ژن و تحقیقات ژنتیکی حیاتی شده است. در تولید کتابخانه‌های cDNA: روش‌ها و پروتکل‌ها، محققان و مخترعان خبره در این زمینه تکنیک‌های اثبات‌شده خود را برای تولید کتابخانه‌های cDNA/mRNA برای شناسایی عملکرد توالی‌های ژنی رمزگشایی شده خاص توصیف می‌کنند. طیف گسترده ای از تکنیک ها برای افزایش تولید کتابخانه های کامل و تمام طول و برای تایید کیفیت cDNA های تولید شده ارائه شده است. از جمله کاربردهایی که به تفصیل انجام شده عبارتند از: الکتروفورز، نورترن بلات، آنالیز ریزآرایه تک سلولی، هیبریداسیون کاهشی، شبیه سازی کاهشی، شبیه سازی ژن، و تولید کتابخانه پپتید. هر روش شامل اطلاعات پس زمینه، دستورالعمل های گام به گام، فهرستی از معرف ها، نکات عملیاتی و یادداشت هایی در مورد ابزار دقیق است. یک آموزش پس زمینه اطلاعات ضروری را ارائه می دهد: تعریف کتابخانه cDNA، انواع مختلف کتابخانه های cDNA، تفاوت بین روش های تولید کتابخانه cDNA با استفاده از رویکردهای مرسوم یا استراتژی های جدید، و کیفیت کتابخانه های cDNA.
جدیدترین و بسیار کاربردی، تولید کتابخانه‌های cDNA: روش‌ها و پروتکل‌ها انواع تکنیک‌های قدرتمند و قابل تکرار را برای تولید طیف وسیعی از کتابخانه‌های کامل و تمام طول cDNA/mRNA مورد نیاز در تحقیقات ژنتیکی پیشرو امروزی.

With the decoding of the human genome and the potential application of its information to gene chips, the ability to generate cDNA libraries for functional assays of specific gene sequences has become critical in gene manipulation and genetic research. In Generation of cDNA Libraries: Methods and Protocols, expert researchers and inventors in the field describe their own proven techniques for generating cDNA/mRNA libraries to identify the functions of specific decoded gene sequences. A wide variety of techniques is presented for enhancing the generation of complete and full-length libraries, and for confirming the quality of the cDNAs generated. Among the applications detailed are electrophoresis, Northern blotting, single-cell microarray analysis, subtractive hybridization, subtractive cloning, gene cloning, and peptide library generation. Each method includes background information, step-by-step instructions, a list of reagents, operational tips, and notes on instrumentation. A background tutorial provides essential information: the definition of a cDNA library, the various types of cDNA libraries, the differences between methods for cDNA library generation using either conventional approaches or novel strategies, and the quality of cDNA libraries.
State-of-the-art and highly practical, Generation of cDNA Libraries: Methods and Protocols provides a variety of powerful and readily reproducible techniques for the generation of the entire range of complete, full-length cDNA/mRNA libraries needed in today's forefront genetic research.