Enzyme-Mediated Immunoassay

T. T. Ngo و H. M. Lenhoff گروه رشد و زیست شناسی سلولی دانشگاه کالیفرنیا، ایروین، CA 92717 در سال 1959، Yalow و Berson از انسولین نشاندار شده با ید رادیواکتیو برای ایجاد یک روش کمی ایمونولوژیک برای تعیین مقدار انسولین در پلاسمای انسان استفاده کردند. روش آنها به رقابت بین انسولین نشاندار شده با ید رادیواکتیو (II 1) و انسولین بدون برچسب از پلاسما برای تعداد ثابت و محدودی از محل های اتصال خاص روی آنتی بادی به انسولین بستگی دارد. مقدار انسولین نشاندار متصل به آنتی بادی با مقدار انسولین موجود در نمونه پلاسما نسبت معکوس دارد. روش آنها که از نظر مفهوم بسیار ساده است، با توانایی تشخیص آسان سطوح بسیار پایین رادیواکتیویته، و ویژگی عالی یک آنتی بادی که قادر به اتصال اختصاصی آنالیت است، ممکن شده است. چنین ترکیبی از حساسیت و ویژگی اساس این ابزار تحلیلی همه کاره به نام رادیوایمونواسی (RIA) است. دوازده سال بعد، Engvall و Perlmann (1971) و Van Weemen و Schuurs (1971) به طور مستقل استفاده از آنزیم ها را به عنوان دسته دیگری از برچسب های حساس و حتی همه کاره تر برای استفاده در سنجش ایمنی معرفی کردند. Engvall و Perlmann (l971) اصطلاح ELISA را ابداع کردند که مخفف عبارت Enzyme Linked Immunosorbent Assay است.

T. T. Ngo and H. M. Lenhoff Department of Developmental and Cell Biology University of California, Irvine, CA 92717 In 1959, Yalow and Berson used insulin labeled with radioactive iodine to develop a quantitative immunological method for determining the amount of insulin in human plasma. Their method depends upon ~ competition between insulin labeled with radioactive iodine (II 1) and unlabeled insulin from plasma for a fixed and limited number of specific binding sites on the antibody to insulin. The amount of the labeled insulin bound to the antibody is inversely proportional to the amount of insulin in the plasma sample. Their method, which is so elegantly simple in concept, is made possible by the ability to detect with ease extremely low levels of radioactivity, and by the exquisite specificity of an antibody capable of specifically binding the analyte. Such a combination of sensitivity and specificity is the basis of this versatile analytical tool called radioimmunoassay (RIA). Twelve years later, Engvall and Perlmann (1971) and Van Weemen and Schuurs (1971) independently introduced the use of enzymes as another category of sensitive and even more versatile labels for use in immunoassays. Engvall and Perlmann (l971) coined the term ELISA, which stands for Enzyme Linked Immunosorbent Assay.