Directed Evolution Library Creation: Methods and Protocols

ایجاد کتابخانه تکامل هدایت‌شده: روش‌ها و پروتکل‌ها، ویرایش دوم پروتکل‌های کاربرپسند را برای استراتژی‌های اثبات‌شده و رویکردهای پیشرفته برای ایجاد کتابخانه‌های ژن جهش یافته برای تکامل هدایت‌شده ارائه می‌دهد. علاوه بر روش‌های تجربی، اطلاعات در مورد رویکردهای محاسباتی فعلی در قالبی کاربرپسند ارائه می‌شود که به محققان اجازه می‌دهد بدون نیاز به درک جزئیات فنی کامل هر الگوریتم، انتخاب‌های آگاهانه داشته باشند. تکامل هدایت شده به یک رویکرد اساسی برای پروتئین های مهندسی برای افزایش فعالیت و کشف روابط ساختار-عملکرد تبدیل شده است و از توسعه سریع حوزه زیست شناسی مصنوعی در دهه گذشته پشتیبانی کرده است. موضوعاتی که به سه بخش مناسب تقسیم می‌شوند، شامل استراتژی‌های جهش‌زایی نقطه‌ای، روش‌های نوترکیبی است که در آن تنوع ژنتیکی از ژن‌های والدین متعددی که از طریق تکنیک‌های وابسته به همولوژی یا مستقل از هم ترکیب می‌شوند و انواع روش‌های محاسباتی برای هدایت طراحی و تجزیه و تحلیل کتابخانه‌های جهش‌یافته با یکدیگر ترکیب می‌شوند. . این فصل‌ها که با فرمت موفق روش‌ها در زیست‌شناسی مولکولی نوشته شده‌اند، شامل مقدمه‌ای بر موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، پروتکل‌های گام به گام و به‌راحتی قابل تکرار و یادداشت‌هایی در مورد عیب‌یابی و اجتناب از ناشناخته هستند. مشکلات.

معتبر و به راحتی قابل دسترسی است، ایجاد کتابخانه تکامل هدایت شده: روش ها و پروتکل ها، ویرایش دوم به عنوان یک کتابچه راهنمای قابل اعتماد برای مهندسان پروتئین مبتدی و با تجربه و زیست شناسان مصنوعی عمل می کند. نوآوری فنی بیشتر و بهره برداری از تکامل هدایت شده را برای درک عمیق تر طراحی و عملکرد پروتئین امکان پذیر می کند.

Directed Evolution Library Creation: Methods and Protocols, Second Edition presents user-friendly protocols for both proven strategies and cutting-edge approaches for the creation of mutant gene libraries for directed evolution. As well as experimental methods, information on current computational approaches is provided in a user-friendly format that will allow researchers to make informed choices without needing to comprehend the full technical details of each algorithm. Directed evolution has become a fundamental approach for engineering proteins to enhance activity and explore structure-function relationships, and has supported the rapid development of the field of synthetic biology over the last decade. Divided into three convenient sections, topics include point mutagenesis strategies, recombinatorial methods wherein genetic diversity is sourced from multiple parental genes that are combined via either homology-dependent or -independent techniques and a variety of computational methods to guide the design and analysis of mutant libraries. Written in the successful Methods in Molecular Biology series format, chapters include introductions to their respective topics, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step, readily reproducible protocols and notes on troubleshooting and avoiding known pitfalls.

Authoritative and easily accessible, Directed Evolution Library Creation: Methods and Protocols, Second Edition will serve as a reliable manual for both novice and experienced protein engineers and synthetic biologists and will enable further technical innovation and the exploitation of directed evolution for a deeper understanding of protein design and function.