Differential-Display Reverse Transcription-PCR (DDRT-PCR)

شناسایی ژن‌های بیان شده متفاوت یکی از چالش‌های اصلی در زیست‌شناسی مولکولی است. چندین تکنیک امکان شبیه سازی چنین توالی هایی را فراهم می کند. با این حال، روش هایی مانند تفریق RNA یا هیبریداسیون افتراقی زمان بر هستند و به مقادیر زیادی mRNA نیاز دارند.
اخیراً، یک رویکرد جدید با موفقیت توسعه یافته است: رونویسی معکوس با نمایش دیفرانسیل-PCR (DDRT-PCR). ثابت شده است که این تکنیک در شناسایی توالی هایی که به طور متفاوت در انواع مختلف سلول بیان می شوند بسیار مؤثر است. با این حال، بارزترین مزیت این است که تنها نانوگرم RNA کل کافی است. بنابراین هر گونه mRNA بیان شده در سیستم سلولی را می توان بررسی کرد، حتی آنهایی که در سطوح بسیار پایین وجود دارند.

Identification of differentially expressed genes is one of the major challenges in molecular biology. Several techniques allow the cloning of such sequences. However, methods such as RNA subtraction or differential hybridization are time-consuming and require large amounts of mRNA.
Recently, a new approach has successfully been developed: Differential-Display Reverse Transcription-PCR (DDRT-PCR). This technique has been proven to be highly effective in identifying sequences that are differentially expressed in various cell types. The most striking advantage is, however, that only nanograms of total RNA are sufficient. Thus every mRNA species expressed in the cell system can be investigated, even those present at very low levels.