Der Experimentator: Proteinbiochemie/Proteomics

ویرایش هفتم اصلاح شده و به روز شده این کتاب مروری بر روش های اثبات شده و جدید در بیوشیمی پروتئین و پروتئومیکس ارائه می دهد. راه های خروج از بن بست های تجربی و استراتژیک را نشان می دهد. همچنین احساسی را برای آزمایش درست در زمان مناسب بیدار می کند. روش های کلاسیک مانند کروماتوگرافی ستونی، HPLC، الکتروفورز، بلات، الایزا، آزمایش های اتصال لیگاند، تولید آنتی بادی، حل شدن پروتئین های غشایی، آنالیز گلیکوپروتئین ها و غیره درمان می شوند روش های مدرن فضای زیادی را اشغال می کنند: جرم طیف سنجی، پروتئومیکس و آنالیز حرارتی. در 7. ویرایش th تکنیک های جدید برای تعیین برهمکنش پروتئین ها با پروتئین ها یا پروتئین ها با مولکول های کوچک شامل DARTS، DRACALA، SPROX و دیگران است. شما همچنین یاد خواهید گرفت که چگونه یک پیوند را با طیف سنج جرمی اندازه گیری کنید. روش‌هایی برای تولید پروتئین‌های اتصال در برابر مولکول‌های هدف خاص نیز ارائه شده‌اند: نمایش ریبوزوم و تکنیک‌های آپتامر DNA و پپتید. تشخیص فلورسانس پروتئین ها با کمک ترکیبات تری هالوژن را نباید از دست داد و اگر می خواهید پایداری و تاخوردگی پروتئین ها را اندازه گیری کنید، می توانید اینجا بخوانید که آیا باید از طیف سنج CD استفاده کنید یا خیر. پیشرفت‌ها در HPLC و طیف‌سنجی جرمی پروتئین‌های غشایی و همچنین بازسازی آنها در نانودیسک‌ها مورد بحث قرار گرفته‌اند. میکرودیسکسیون با لیزر UV، فوکوس ایزوالکتریک در مویرگ ها و برچسب های iTRAQ توضیح داده شده است. همچنین تعدادی ترفند جدید برای تعیین پروتئین، رنگ آمیزی ژل، تکنیک های بلات، رنگ آمیزی ایمنی، شستشو از قطعات ژل و غیره وجود دارد.

Die überarbeitete und aktualisierte 7. Auflage dieses Buches gibt einen Überblick über bewährte und neue Methoden der Proteinbiochemie und Proteomics. Es zeigt Auswege aus experimentellen und strategischen Sackgassen. Zudem weckt es ein Gespür für das richtige Experiment zur richtigen Zeit. Behandelt werden klassische Verfahren wie Säulenchromatographie, HPLC, Elektrophoresen, Blots, ELISA, Ligandenbindungstests, die Herstellung von Antikörpern, das Solubilisieren von Membranproteinen, die Analyse von Glykoproteinen usw. Einen großen Raum nehmen die modernen Verfahren ein: Massenspektrometrie, Proteomics und thermische Analyse. In die 7. Auflage wurden neue Techniken zur Bestimmung der Wechselwirkung von Proteinen mit Proteinen oder von Proteinen mit kleinen Molekülen aufgenommen: DARTS, DRACALA, SPROX und andere. Des weiteren erfahren Sie, wie man mit dem Massenspektrometer eine Bindung misst. Auch Methoden zur Herstellung von Bindungsproteinen gegen bestimmte Zielmoleküle werden vorgestellt: Ribosomen Display und DNA- und Peptid-Aptamer-Techniken. Der Fluoreszenznachweis von Proteinen mit Hilfe von Trihalogenverbindungen durfte nicht fehlen und wer die Stabilität und Faltung von Proteinen messen will, kann hier nachlesen, ob er dazu ein CD-Spektrometer benutzen sollte. Auf die Fortschritte in der HPLC und der Massenspektrometrie von Membranproteinen wird ebenso eingegangen wie auf ihre Rekonstitution in Nanoscheibchen (Nanodiscs). Die Mikrodissektion mit UV-Laser, die isoelektrische Fokussierung in Kapillaren und iTRAQ-Tags werden erklärt. Dazu kommt eine Anzahl neuer Tricks zur Proteinbestimmung, Gelfärbung, Blottechnik, Immunfärbung, Elution aus Gelstückchen etc.