Cytochrome P450 Protocols

برای این ویرایش دوم Cytochrome P450 که بسیار تحسین شده است، ویراستاران حساب‌هایی از تکنیک‌های اصلی که از جدیدترین روش‌ها برای بررسی P450 استفاده می‌کنند، جمع‌آوری کرده‌اند. نکات برجسته شامل پروتکل هایی برای تجزیه و تحلیل طیفی و خالص سازی P450s، سنجش آنزیمی P450s و منواکسیژنازهای حاوی فلاوین (FMOs)، بیان P450s و FMOs در سیستم های هترولوگ، و تولید و استفاده از آنتی بادی های آنتی پپتیدی است. فصل‌های اضافی شامل تکنیک‌های قابل تکرار آسان برای ترانسفکشن سلول‌های کبدی برای مطالعات تنظیم ژن، سنجش‌های ژن گزارشگر P450، هیبریداسیون درجا، و تجزیه و تحلیل پلی‌مورفیسم‌های ژنتیکی است. همچنین تکنیک هایی برای تولید موش هایی با اختلالات ژنی هدفمند توضیح داده شده است. اگر چه تاکید بر P450s با منشاء پستانداران است، بسیاری از روش‌های قابل تکرار شرح داده شده برای P450 از هر منبعی مناسب هستند. هر فصل توسط محققانی نوشته شده است که در توسعه و بکارگیری این تکنیک خاص برای P450 یا FMO شرکت داشته اند. پروتکل ها به صورت گام به گام و با ارجاعات متقابل گسترده به یادداشت ها ارائه می شوند که مراحل بحرانی، مشکلات احتمالی و روش های جایگزین را برجسته می کند تا محقق بتواند اساس روش را درک کند و آن را با موفقیت انجام دهد.
پیشرفته و بسیار کاربردی، Cytochrome P450، ویرایش دوم، همه ابزارهای مورد نیاز امروز را برای روشن کردن نقش حیاتی بیولوژیکی سیتوکروم P450 در متابولیسم داروهای درمانی، مواد سرطان‌زای شیمیایی، برای تازه‌کاران و محققین با تجربه در بسیاری از زمینه‌ها فراهم می‌کند. آلاینده های محیطی.

For this second edition of their much praised Cytochrome P450, the editors have collected accounts of the essential core techniques that use the latest methodologies for the investigation of P450s. Highlights include protocols for spectral analysis and purification of P450s, enzymatic assays of P450s and flavin-containing monooxygenases (FMOs), expression of P450s and FMOs in heterologous systems, and the production and use of antipeptide antibodies. Additional chapters contain readily reproducible techniques for the transfection of hepatocytes for gene regulation studies, P450 reporter gene assays, in situ hybridization, and analysis of genetic polymorphisms. Also described are techniques for the generation of mice with targeted gene disruptions. Although the emphasis is on P450s of mammalian origin, many of the readily reproducible methods described are suitable for P450s from any source. Each chapter is written by researchers who have been involved in the development and application of the particular technique to P450s or FMOs. The protocols are presented in a step-by-step manner, with extensive cross-references to notes that highlight critical steps, potential problems, and alternative methods so that the researcher can understand the basis of the method and perform it successfully.
Cutting-edge and highly practical, Cytochrome P450, Second Edition provides both novices and experienced researchers across many fields all the tools needed today to elucidate the crucial biological role played by cytochrome P450 in the metabolism of therapeutic drugs, chemical carcinogens, and environmental pollutants.