دسترسی نامحدود
برای کاربرانی که ثبت نام کرده اند
برای ارتباط با ما می توانید از طریق شماره موبایل زیر از طریق تماس و پیامک با ما در ارتباط باشید
در صورت عدم پاسخ گویی از طریق پیامک با پشتیبان در ارتباط باشید
برای کاربرانی که ثبت نام کرده اند
درصورت عدم همخوانی توضیحات با کتاب
از ساعت 7 صبح تا 10 شب
ویرایش: 1 نویسندگان: H. P. Saluz, J. P. Jost (auth.) سری: BioMethods ISBN (شابک) : 9783764323691, 9783034877244 ناشر: Birkhäuser Basel سال نشر: 1990 تعداد صفحات: 282 زبان: English فرمت فایل : PDF (درصورت درخواست کاربر به PDF، EPUB یا AZW3 تبدیل می شود) حجم فایل: 8 مگابایت
کلمات کلیدی مربوط به کتاب راهنمای آزمایشگاهی برای مطالعات in vivo متیلاسیون DNA و برهمکنشهای پروتئین/DNA: علم، عمومی
در صورت تبدیل فایل کتاب A laboratory guide for in vivo studies of DNA methylation and protein/DNA interactions به فرمت های PDF، EPUB، AZW3، MOBI و یا DJVU می توانید به پشتیبان اطلاع دهید تا فایل مورد نظر را تبدیل نمایند.
توجه داشته باشید کتاب راهنمای آزمایشگاهی برای مطالعات in vivo متیلاسیون DNA و برهمکنشهای پروتئین/DNA نسخه زبان اصلی می باشد و کتاب ترجمه شده به فارسی نمی باشد. وبسایت اینترنشنال لایبرری ارائه دهنده کتاب های زبان اصلی می باشد و هیچ گونه کتاب ترجمه شده یا نوشته شده به فارسی را ارائه نمی دهد.
ملاحظات ایمنی توالی یابی ژنومی شامل چندین مرحله خطرناک است، مانند مواد شیمیایی با جریان بالا، ولتاژ بالا، مواد شیمیایی رادیویی و بسیار سمی. از این رو، کاملاً ضروری است که دستورالعملهای سازنده تجهیزات/آیتورها رعایت شود و توجه ویژه به مقررات ایمنی لول و جدرال معطوف شود. I مقدمه 13 B مقدمه هیپومتیلاسیون DNA با فعال شدن thc بسیاری از ژن های یوکاریوتی همبستگی مثبت دارد. در طول انتقال از ژن های غیر فعال به فعال، تغییراتی در الگوی تعامل پروتئین/DNA رخ می دهد. فعالسازی رونویسی ژنهای یوکاریوتی بوسیله برهمکنشهای خاص فاکتورهای تراکنش با محلهای اتصال DNA مربوطه در مناطق کنترل Lhe (پرموتورها، تقویتکنندهها) ژنها انجام میشود. این فرآیند از لن همراه با تغییراتی در ساختار کروماتین موضعی است که با ظهور مکانهای حساس به نوکلئاز، به همان اندازه که با تغییرات در برهمکنشهای پروتئین-DNA و در مورد یوکاریوتهای بالاتر، تغییرات الگوی متیلاسیون سیتوزین مشاهده میشود، مشاهده میشود. تنها تکنیک تجربی موجود که امکان مطالعه پدیدههای اخیر را در وضوح تک نوکلئوتیدی فراهم میکند، توالییابی/ردپای ژنومی مستقیم است که توسط چرچ و گیلبرت (1984) پیشگام شد. این روش روش توالییابی DNA شیمیایی Maxam amI Gilbert (1980) را با توالیهای DNA 01' thc با الکتروبلات و نشانگذاری غیرمستقیم انتهایی توسط hybridiza tl0n ترکیب میکند. یک امکان جایگزین، روش جدید است (Saluz and . lost, 1989)، با استفاده از Taq polymerase. مراحل اول 01' هر دو روش اساساً یکسان هستند: DNA کل ژنومی با یک آنزیم محدود کننده مناسب هضم می شود و قطعات DNA حاصل از نظر شیمیایی توالی یابی می شوند.
A Safety Considerations Genomie sequencing involves a number oj hazard ous steps, such as high eurrent, high voltage, radioaetive and highly toxie chemieals. It is, the- jore, absolutely essential that the instruetions oj equipment manu/aeturers bejollowed and that par tieular attention is paid to the loeal and jederal safety regulations. I Introduction 13 B Introduction Hypomethylation ofDNA has been positively correlated with thc activation of many eucaryotic genes. During the transition from inactive to active genes changes in the protein/DNA interaction pattern occur. Tran scriptional activation of eucaryotic genes is mediated by specific interac tions oftransacting factors with their respective DNA binding sites in Lhe control regions (promoters, enhancers) ofthe genes. This process is ofLen accompanied by changes in local chromatin strucLure, witnessed by the appearance of nuclease hypersensitive sites, as weil as by changes in protein-DNA interactions and, in the case of higher eucaryotes, alterations ofthe cytosine methylation pattern. The sole available experimental tech nique that permits the study ofthe latter phenomena at single nucleotide resolution is direct genomic sequencing/footprinting, pioneered by Church and Gilbert (1984). This method combines the chemical DNA sequencing procedure of Maxam amI Gilbert (1980) with thc detection 01' DNA sequences by electroblotting and indirect end-Iabeling by hybridiza tl0n. An alternative possibility is the novel procedure (Saluz and . lost, 1989), using Taq polymerase. The first steps 01' both meLhods are essen tially the same: total genomic DNA is digested wiLh a suilable restriction enzyme and the resulting DNA fragments are chemically sequeneed.
Front Matter....Pages 1-11
Introduction....Pages 13-15
DNA Isolation from Different Tissues and Cell Lines....Pages 17-46
Preparation and Treatment of Cells for Genomic Footprinting....Pages 47-59
Genomic Sequencing with Taq Polymerase (Linear Amplification)....Pages 61-113
Using Exponential Amplification and Dideoxysequencing of Genomic DNA to Study Mutations....Pages 115-128
The “Classical” Procedure....Pages 129-214
Trouble-Shooting Guide and Examples....Pages 215-253
Appendix....Pages 255-274
Bibliography....Pages 275-280
Back Matter....Pages 281-286