Rho GTPases: Methods and Protocols

اگرچه در ابتدا به عنوان تنظیم کننده اصلی بازسازی اسکلت سلولی توصیف شد، Rho GTPases در ایجاد قطبیت، اندوسیتوز، قاچاق وزیکول، مورفوژنز، سیتوکینز، فعال سازی رونویسی، پیشرفت چرخه سلولی و آپوپتوز دخیل بوده اند. . علاوه بر این، Rho GTPaseها به دلیل مشارکت در تومورزایی و متاستاز، در شرایط قلبی عروقی، و به عنوان اهداف عوامل عفونی، اهمیت پزشکی پیدا کرده‌اند. این زمینه با مشارکت مطالعات بر روی ارگانیسم‌های مدل (گیاهان، آمیب‌ها، قارچ‌ها، بی‌مهرگان)، حتی بیشتر گسترش یافته است، که هرکدام دیدگاه خاصی را به پیچیدگی خانواده اضافه می‌کنند و درک ما را از این اجزای مهم سیگنال‌دهنده غنی‌تر می‌کنند. Rho GTPase: Methods and Protocols که به پنج بخش مناسب تقسیم شده است، یک نمای کلی تاریخی از این زمینه و گزارشی از فیلوژنتیک خانواده Rho، روش های بیوشیمیایی عمومی، و سنجش های عملکردی ارائه می دهد که امکان نظارت بر پیامدهای بیماری را فراهم می کند. دستکاری Rho GTPases در زمینه های مختلف. علاوه بر این، این جلد بخشی را به روش‌های تصویربرداری پیشرفته و روش‌های توان عملیاتی بالا که اخیراً توسعه یافته‌اند، اختصاص می‌دهد و با تکنیک‌هایی که به‌طور خاص برای مطالعات بر روی ارگانیسم‌های مدل غیر پستانداران منتخب طراحی شده‌اند، بسته می‌شود. این فصل‌ها که در قالب موفق سری روش‌ها در زیست‌شناسی مولکولی™ نوشته شده‌اند، شامل مقدمه‌ای بر موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، پروتکل‌های گام به گام و به آسانی قابل تکرار، و یادداشت‌هایی در مورد عیب‌یابی و اجتناب از دام های شناخته شده.

معتبر و به راحتی قابل دسترسی، Rho GTPase: روش ها و پروتکل ها تکنیک هایی را ارائه می دهد که برای محققان در این زمینه استاندارد هستند، اما شامل پروتکل هایی نیز می شود. برای کسانی که از قبل با برخی از تکنیک ها آشنا هستند و می خواهند جنبه های دیگری را کشف کنند.

Although initially described as major regulators of cytoskeletal remodeling, Rho GTPases have been implicated in the establishment of polarity, endocytosis, vesicle trafficking, morphogenesis, cytokinesis, transcriptional activation, cell cycle progression, and apoptosis, to mention a few. In addition, Rho GTPases have acquired medical relevance because of their participation in tumorigenesis and metastasis, in cardiovascular conditions, and as targets of infectious agents. The field has broadened even more with the contribution of studies in model organisms (plants, amoebas, fungi, invertebrates), each adding a particular view to the complexity of the family and vastly enriching our perception of these important signaling components. Divided into five convenient sections, Rho GTPase: Methods and Protocols provides an historical overview of the field and an account of the phylogenetics of the Rho family, general biochemical methods, and functional assays that allow monitoring the consequences of manipulating Rho GTPases in a variety of contexts. Additionally, the volume devotes a section to advanced imaging methods and to recently developed high throughput methods, closing with techniques specifically designed for studies in selected non-mammalian model organisms. Written in the successful Methods in Molecular Biology™ series format, chapters include introductions to their respective topics, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step, readily reproducible protocols, and notes on troubleshooting and avoiding known pitfalls.

Authoritative and easily accessible, Rho GTPase: Methods and Protocols provides techniques that are standard for researchers in the field but also includes protocols for those who, being already familiar with some of the techniques, wish to explore additional aspects.