Protein-Microarrays für die Wirkstoffentwicklung: Herstellung und Charakterisierung eines bakteriellen Hitzeschockproteins

Emilia Schax تولید پروتئین‌های شوک حرارتی و توسعه یک غربالگری بازدارنده رقابتی مستقیم برای پروتئین‌های شوک حرارتی در قالب ریزآرایه را توصیف می‌کند. این سنجش اطلاعاتی را در مورد خواص اتصال بازدارنده‌های بالقوه ارائه می‌کند، که می‌توانند در مدت زمان بسیار کوتاهی با مصرف مواد کم به عنوان درمان‌های ممکن عمل کنند. این سنجش بر اساس رقابت ATP نشاندار شده با فلورسنت با بازدارنده‌های بالقوه برای جیب اتصال ATP پروتئین‌ها است. در طول پایان نامه کارشناسی ارشد، ده مهار کننده بالقوه که مشتقات ژلدانامایسین یا ربلاستاتین هستند مورد آزمایش قرار گرفتند. مقادیر IC50 آنها بین 0.5 نانومتر تا 4 میکرومولار بود.

Emilia Schax beschreibt die Herstellung von Hitzeschockproteinen und die Entwicklung eines direkt-kompetitiven Inhibitor-Screenings für Hitzeschockproteine im Microarray-Format. Dieser Assay liefert in kürzester Zeit mit geringem Materialverbrauch Informationen zu den Bindeeigenschaften potenzieller Inhibitoren, die dann als mögliche Therapeutika dienen könnten. Der Assay basiert auf der Kompetition von fluoreszenzmarkierten ATP mit den potentiellen Inhibitoren um die ATP-Bindetasche der Proteine. Während der Masterarbeit wurden zehn potentielle Inhibitoren, die Geldanamycin- oder Reblastatin-Derivate sind, getestet. Ihre IC50-Werte lagen im Bereich zwischen 0,5 nM und 4 µM.