Principes des techniques de biologie moléculaire

SOMMAIRE......Page 9
1. Structure et expression d\'un gène eucaryote codant un ARNm et une protéine......Page 12
2. Paramètres de description d\'un génome......Page 14
3. Séquençage de génomes entiers......Page 18
4. Enzymes de restriction......Page 20
5. Electrophorèse des acides nucléiques......Page 22
6. Description d\'un plasmide et d\'un phagemide......Page 24
7. Description d\'un bactériophage et d\'un cosmide......Page 26
8. Description d\'un YAC et autres grands vecteurs......Page 28
9. Clonage moléculaire......Page 30
10. Transformation génétique des bactéries et des levures......Page 33
11. Marquage de l\'ADN......Page 35
12. Hybridation moléculaire......Page 38
13. Hybridation in situ des ARNm......Page 42
14. Construction d\'une banque d\'ADN génomique......Page 44
15. Construction d\'une banque d\'ADNc......Page 46
16. Criblage d\'une banque......Page 48
17. Criblage différentiel : banques d\'ADNc soustraites, AFLP-ADNc......Page 52
18. Criblage différentiel par DD RT-PCR : tri d\'ARNm (differential display RT-PCR)......Page 56
19. Criblage différentiel par SSH : hybridation soustractive et suppressive (suppression substractive hybridization)......Page 60
20. Criblage différentiel par RDA : analyse par différence de représentation (representational difference analysis)......Page 64
21. EST : étiquettes de gènes exprimés (expressed séquence tags)......Page 68
22. Réseaux d\'ADN: puces à ADN, filtres d\'ADNc......Page 71
23. Séquençage d\'ADN......Page 82
24. PCR (polymerase chain réaction)......Page 86
25. RACE : amplification rapide d\'extrémités d\'ADNc (rapid amplification of cDNAs ends)......Page 88
26. Marche génomique par PCR......Page 92
27. RT-PCR: PCR sur ARNm (reverse transcriptase PCR)......Page 94
28. Transcription in vitro......Page 96
29. Détermination du site d\'initiation de la transcription......Page 98
30. Analyse fonctionnelle de promoteurs......Page 100
31. Gel-retard......Page 102
32. Empreinte à la DNase I (footprinting)......Page 104
33. Transformation génétique des végétaux par Agrobacterium tumefaciens......Page 106
34. Transfert direct de gènes dans des protoplastes végétaux......Page 111
35. Transfert direct de gènes par biolistique......Page 112
36. Transformation génétique de cellules animales......Page 113
37. Le clonage des animaux......Page 116
38. Expression transitoire......Page 120
39. Protéines recombinantes......Page 122
40. Les baculovirus d\'insectes, vecteurs d\'expression de gènes étrangers......Page 126
41. Système du double hybride......Page 130
42. Mutagenèse dirigée......Page 134
43. Complémentation de mutation chez la Levure......Page 138
44. Inactivation de gènes (knock-ouf)......Page 140
45. Étiquetage moléculaire......Page 142
46. RNAi : inactivation de gènes par interférence d\'ARN (RNA interférence)......Page 146
47. Marqueurs génétiques moléculaires......Page 149
48. Cartes génétique et physique......Page 154
49. PFGE : électrophorèse en champs pulsés (pulse field electrophoresis)......Page 158
50. RFLP : polymorphisme de longueur des fragments de restriction (restriction fragment lenght polymorphism)......Page 160
51. RAPD : polymorphisme d\'ADN par amplification aléatoire (random amplified polymorphic DNA)......Page 162
52. AFLP : polymorphisme de longueur de fragments amplifiés (amplified fragment length polymorphism)......Page 164
53. Les rétromarqueurs......Page 166
54. SSCP : polymorphisme de conformation de l\'ADN monocaténaire (single strand conformation polymorphism)......Page 170
55. DGGE : électrophorèse de l\'ADN en gradient de gel dénaturant (denaturing gel gradient electrophoresis)......Page 172
56. SNP : polymorphisme d\'un seul nucléotide (single nucleotide polymorphism)......Page 174
57. SSR : microsatellites, répétitions de séquences simples (simple sequence repeats)......Page 176
Liste des rédacteurs......Page 181