Membrane Receptors: Methods for Purification and Characterization

تقریباً یک دهه پیش، گیرنده های غشایی مفهومی جذاب اما تا حد زیادی اثبات نشده بودند. از آن زمان پیشرفت های عظیمی حاصل شده است، و ما اکنون می توانیم گیرنده ها را بسیار دقیق تر در نظر بگیریم. وجود آنها ثابت شده، خاصیت اتصال آنها مشخص شده و در برخی موارد به شدت خالص شده و خواص فیزیکی - شیمیایی آنها مورد مطالعه قرار گرفته است. اکنون حتی می توان برخی از گیرنده ها را به صورت میکروسکوپی تجسم کرد. این پیشرفت عمدتاً ناشی از توسعه روش های بسیار قدرتمند است. این روش ها موضوع این جلد است. اگرچه به طور قابل توجهی متنوع هستند، اما گیرنده های مختلف ویژگی های مشترک خاصی دارند و مشکلات مشترکی در مطالعه آنها وجود دارد. در نتیجه، تعداد کمی از تکنیک ها به ویژه در مطالعه انواع مختلف گیرنده ها مفید هستند. بنابراین، منطقی است که در مورد روش گیرنده غشایی صحبت کنیم. یک مشکل بسیار آشکار در مطالعه گیرنده های غشایی وجود آنها در مقادیر بسیار کم و در حالت بسیار ناخالص است. بنابراین، تکنیک های بسیار حساس و خاصی برای تشخیص، شناسایی و خالص سازی آنها مورد نیاز است. چنین حساسیت و ویژگی با توانایی گیرنده‌ها برای اتصال لیگاندهای خاص با وابستگی بسیار بالا فراهم می‌شود، و جای تعجب نیست که بیشتر روش‌های توصیف‌شده در این جلد به این اتصال با میل ترکیبی بالا بستگی دارد. برهمکنش آنتی ژن-آنتی بادی از حساسیت و ویژگی قابل مقایسه ای برخوردار است. اخیراً تعدادی از آنتی بادی های ضد گیرنده تولید شده و یا به طور خود به خود در بیماری های خودایمنی ایجاد می شوند. بدون شک در آینده بیشتر تولید خواهد شد.

Hardly a decade ago, membrane receptors were an attractive but largely unproven concept. Since that time enormous progress has been made, and we are now able to consider receptors much more concretely. Their existence has been established, their binding properties have been determined, and in some cases, they have been highly purified and their physical-chemical properties studied. It is now even possible to visualize microscopically some receptors. This progress has resulted largely from the development of highly powerful methods. These methods are the subject of this volume. Although considerably diverse, different receptors share certain common pro­ perties, and common problems are encountered in their study. Consequently, a small number of techniques are particularly useful in studying different types of receptors. Thus, it makes sense to speak about membrane receptor methodology. A very apparent problem in the study of membrane receptors is their presence in exceedingly small quantities and in a highly impure state. Therefore, very sensitive and specific techniques are required for their detection, characterization and purification. Such sensitivity and specificity is provided by the ability of receptors to bind certain ligands with very high affmity, and it is not surprising that most of the methods described in this volume depend upon this high affinity binding. The antigen-antibody interaction is of comparable sensitivity and speci­ ficity. Recently, a number of anti-receptor antibodies have been produced or found to occur spontaneously in auto-immune diseases. Undoubtedly, more will be produced in the future.