Low-Cost Methods for Molecular Characterization of Mutant Plants: Tissue Desiccation, DNA Extraction and Mutation Discovery: Protocols

این کتاب سنجش‌های مولکولی کم‌هزینه و سریعی را برای شناسایی ژرم پلاسم گیاهی جهش یافته ارائه می‌دهد. پروتکل های مفصلی برای خشک کردن بافت های گیاهی ارائه شده است. استخراج DNA با کیفیت بالا برای کاربردهای پایین دست. استخراج نوکلئازهای تک رشته ای خاص برای پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی. و کشف درج/حذف کوچک با استفاده از الکتروفورز استاندارد ژل آگارز. روش های توصیف شده را می توان در هر آزمایشگاه مجهز به زیست شناسی مولکولی پایه به کار برد و نیاز به فریزرهای گران قیمت و ترکیبات آلی سمی را برطرف کرد. با اعتبارسنجی مناسب از کیفیت و طول عمر نمونه، آنها می توانند DNA کافی را برای انواع کاربردهای مولکولی، مانند مطالعات نشانگر و TILLING، با تقریباً یک دهم هزینه هر نمونه در مقایسه با کیت های تجاری، فراهم کنند.

This book offers low-cost and rapid molecular assays for the characterization of mutant plant germplasm. Detailed protocols are provided for the desiccation of plant tissues; the extraction of high-quality DNA for downstream applications; the extraction of single-strand-specific nucleases for single nucleotide polymorphism; and small insertion/deletion discovery using standard agarose gel electrophoresis. The methods described can be applied in any laboratory equipped for basic molecular biology and do away with the need for expensive freezers and toxic organic compounds. With the appropriate validation of sample quality and longevity, they can provide sufficient DNA for a variety of molecular applications, such as marker studies and TILLING, at approximately one tenth of the cost per sample when compared to commercial kits.