Lipid Biochemistry: An Introduction

لیپیدها را معمولاً می توان به راحتی از بافت ها با استفاده از ویژگی های آبگریز آنها استخراج کرد. با این حال، چنین استخراج‌هایی مخلوط پیچیده‌ای از کلاس‌های مختلف لیپید به دست می‌دهند که برای تجزیه و تحلیل کمی باید بیشتر خالص شوند. علاوه بر این، عصاره چربی خام توسط مولکول های آبگریز دیگر آلوده می شود، به عنوان مثال. توسط پروتئین های غشایی ذاتی از بین انواع مختلف فرآیندهای جداسازی، کروماتوگرافی لایه نازک و ستونی برای لیپیدهای دست نخورده مفیدتر است. کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) نیز به سرعت در حال محبوب‌تر شدن است، به‌ویژه برای تقسیم‌بندی گونه‌های مولکولی از یک کلاس لیپیدی معین. قوی ترین ابزار برای کمی سازی اکثریت لیپیدها، کروماتوگرافی مایع گازی (GLC) است. این روش بسیار حساس است و اگر با ستون های مویین تطبیق داده شود، می تواند اطلاعاتی را در مورد ویژگی های ظریفی مانند موقعیت یا پیکربندی جانشین ها در امتداد زنجیره های آسیلی ارائه دهد. با جفت کردن GLC یا HPLC به یک آشکارساز رادیواکتیویته، سپس این تکنیک ها برای اندازه گیری متابولیک نیز بسیار مفید هستند. اگرچه آزمایشگاه های تحقیقاتی از روش های تحلیلی به طور کلی پیچیده مانند GLC برای تجزیه و تحلیل و کمیت نمونه های لیپید استفاده می کنند، مشتقات شیمیایی اغلب در بیمارستان ها استفاده می شوند. برای این روش‌ها، نمونه‌های لیپید مشتق می‌شوند تا محصولی به دست آید که می‌تواند به سادگی و با دقت اندازه‌گیری شود - معمولاً با رنگ. بنابراین، کل تری گلیسرول، کلسترول یا فسفولیپید-فسفر را می توان به راحتی و بدون مزاحمت با اطلاعات اضافی گونه های مولکولی، و غیره که ممکن است با تجزیه و تحلیل های دقیق تر تعیین شود، اندازه گیری کرد. مراجع Christie, w.w. (1982) تجزیه و تحلیل لیپید، ویرایش دوم، چاپ پرگامون، آکسفورد.

Lipids can usually be extracted easily from tissues by making use of their hydrophobic characteristics. However, such extractions yield a complex mixture of different lipid classes which have to be purified further for quantitative analysis. Moreover, the crude lipid extract will be contami­ nated by other hydrophobic molecules, e.g. by intrinsic membrane proteins. Of the various types of separation processes, thin layer and column chromatography are most useful for intact lipids. High performance liquid chromatography (HPLC) is also rapidly becoming more popular, especially for the fractionation of molecular species of a given lipid class. The most powerful tool for quantitation of the majority of lipids is gas­ liquid chromatography (GLC). The method is very sensitive and, if adapted with capillary columns, can provide information with regard to such subtle features as the position or configuration of substitutions along acyl chains. By coupling GLC or HPLC to a radioactivity detector, then the techniques are also very useful for metabolic measurements. Although research laboratories use generally sophisticated analytical methods such as GLC to analyse and quantify lipid samples, chemical derivatie:ations are often used in hospitals. For these methods, the lipid samples are derivatized to yield a product which can be measured simply and accurately-usually by colour. Thus, total triacylglycerol, cholesterol or phospholipid-phosphorus can be quantitated conveniently without bothering with the extra information of molecular species, etc. which might be determined by more thorough analyses. REFERENCES Christie, w.w. (1982) Lipid Analysis, 2nd edn, Pergamon Press, Oxford.