Immunoelectron Microscopy: Methods and Protocols

میکروسکوپ ایمونوالکترونی یک تکنیک کلیدی است که شکاف اطلاعاتی بین بیوشیمی، زیست‌شناسی مولکولی، و مطالعات فراساختاری را پر می‌کند و توابع ماکرومولکولی را در یک بافت سلولی قرار می‌دهد. در میکروسکوپ ایمونوالکترونی: روش‌ها و پروتکل‌ها، محققان متخصص ابزارهای زیست‌شناس مولکولی را با ابزارهای میکروسکوپی ترکیب می‌کنند. از جعبه ابزار زیست‌شناسی مولکولی، این جلد روش‌هایی برای تولید آنتی‌ژن با بیان پروتئین در سلول‌های باکتریایی، روش‌هایی برای بیان پروتئین برچسب‌گذاری شده با اپی توپ در سلول‌های گیاهی و حیوانی ارائه می‌دهد که امکان محلی‌سازی پروتئین را در غیاب آنتی‌بادی‌های اختصاصی پروتئین و همچنین روش‌هایی برای تولید آنتی‌بادی‌ها ارائه می‌کند. - آنتی بادی های پپتیدی، مونوکلونال و پلی کلونال. از جعبه ابزار میکروسکوپ، روش های آماده سازی نمونه برای سلول ها، بافت گیاهی و حیوانی ارائه شده است. هر دو روش انجماد، که دارای مزیت حفظ آنتی ژنی پروتئین به ازای یکپارچگی فراساختاری هستند، و همچنین روش‌های تثبیت شیمیایی که یکپارچگی ساختاری را حفظ می‌کنند و در عین حال آنتی ژنی پروتئین را قربانی می‌کنند، با فصل‌هایی که جنبه‌های مختلف برچسب‌گذاری immunogold را بررسی می‌کنند، گنجانده شده‌اند. این فصل‌ها که در قالب‌های بسیار موفق سری Methods in Molecular Biology™ نوشته شده‌اند، شامل مقدمه‌ای بر موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، پروتکل‌های آزمایشگاهی گام به گام و به‌راحتی قابل تکرار و یادداشت‌هایی در مورد عیب‌یابی و اجتناب از مشکلات شناخته شده است. معتبر و ضروری، میکروسکوپ ایمونوالکترونی: روش‌ها و پروتکل‌ها به دنبال تسهیل درک بیشتر از روابط عملکرد ساختار است.

Immunoelectron microscopy is a key technique that bridges the information gap between biochemistry, molecular biology, and ultrastructural studies placing macromolecular functions within a cellular context. In Immunoelectron Microscopy: Methods and Protocols, expert researchers combine the tools of the molecular biologist with those of the microscopist. From the molecular biology toolbox, this volume presents methods for antigen production by protein expression in bacterial cells, methods for epitope tagged protein expression in plant and animal cells allowing protein localization in the absence of protein specific antibodies as well as methods for the production of anti-peptide, monoclonal, and polyclonal antibodies. From the microscopy toolbox, sample preparation methods for cells, plant, and animal tissue are presented. Both cryo-methods, which have the advantage of retaining protein antigenicity at the expense of ultrastructural integrity, as well as chemical fixation methods that maintain structural integrity while sacrificing protein antigenicity have been included, with chapters examining various aspects of immunogold labeling. Written in the highly successful Methods in Molecular Biology™ series format, chapters include introductions to their respective topics, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step, readily reproducible laboratory protocols, and notes on troubleshooting and avoiding known pitfalls. Authoritative and essential, Immunoelectron Microscopy: Methods and Protocols seeks to facilitate an increased understanding of structure function relationships.