Germ Cell Protocols: Volume 2: Molecular Embryo Analysis, Live Imaging, Transgenesis, and Cloning

تحقیقات سلول‌های زایایی در سال‌های اخیر پیشرفت‌های عظیمی را ایجاد کرده است و اخیراً با معرفی فناوری‌های تراریخته و شبیه‌سازی هسته‌ای وارد مرحله انفجاری اکتشافات جدید شده است. در پروتکل‌های سلول‌های زاینده، محققان آزمایشگاهی خبره با جزئیات گام به گام مجموعه‌ای از تکنیک‌های قدرتمند برای آنالیز مولکولی و ژنتیکی سلول‌های زایا در انواع سیستم‌های تولید مثلی مختلف را شرح می‌دهند. این روش‌ها به دلیل موفقیت اثبات‌شده‌شان در پیشبرد درک ما از سلول‌های زاینده، فعال‌سازی اسپرم و تخمک، تحرک، لقاح، توسعه هسته‌ای، شبیه‌سازی هسته‌ای، توصیف مولکولی رویدادهای خاص، تصویربرداری از ساختارهای سلولی، و حفظ انجماد سلول‌های زاینده را پوشش می‌دهند. . جلد 2: تجزیه و تحلیل جنین مولکولی، تصویربرداری زنده، تراریخته و شبیه سازی بر تجزیه و تحلیل تخمک مولکولی، تصویربرداری تخمک زنده، شبیه سازی هسته ای، انجماد تخمک و انتقال هسته تمرکز دارد. نکات برجسته شامل شناسایی و خصوصیات Oct-4، خاموش کردن کروماتین ژرمین توسط RNAi، تفریق cDNA و شبیه سازی در زمینه رشد تروفوبلاست/جفت، و فرسایش انتخابی است. همچنین روش‌هایی برای شبیه‌سازی مبتنی بر PCR، تمایز سلول‌های بنیادی جنینی به اجسام جنینی، تصویربرداری زنده از جنین پستانداران با استفاده از میکروسکوپ چند فوتونی و شبیه‌سازی تخمک‌های خوک، گاو، خرگوش و موش وجود دارد. هر پروتکل به راحتی قابل تکرار با جزئیات گام به گام شرح داده شده است و شامل مقدمه ای است که اصل این تکنیک، لیست تجهیزات و معرف ها، و نکاتی در مورد عیب یابی و اجتناب از مشکلات شناخته شده را بیان می کند. جلد قبلی همراه با آن، تجزیه و تحلیل اسپرم و تخمک، بر سلول‌های اسپرم، تجزیه و تحلیل تخمک، بلوغ تخمک، لقاح، و تکنیک‌های آماده‌سازی تمرکز دارد.
پروتکل‌های سلول‌های زایایی جامع و پیشرفته، مجموعه‌ای با استاندارد طلایی را به محققان تازه‌کار و با سابقه ارائه می‌دهد. از روش‌های سخت یافتنی برای تحقیقات با تأثیر بالا، رویه‌های متنوعی که به راحتی قابل پیگیری هستند، به خوبی نشان داده شده‌اند و امکان انتقال دانش بین گونه‌ای را از مهره‌داران پایین‌تر به سیستم‌های پستانداران بالاتر فراهم می‌کنند.

Germ cell research has produced enormous advances in recent years and more recently has entered into an explosive phase of new discoveries with the introduction of transgenic technologies and nuclear cloning. In Germ Cell Protocols, expert laboratory investigators describe in step-by-step detail a series of powerful techniques for the molecular and genetic analysis of germ cells in a variety of different reproductive systems. Chosen for their proven success in advancing our understanding of germ cells, these methods cover sperm and egg activation, motility, fertilization, nuclear development, nuclear cloning, the molecular characterization of specific events, the imaging of cell structures, and the cryopreservation of germ cells. Volume 2: Molecular Embryo Analysis, Live Imaging, Transgenesis, and Cloning focuses on molecular egg analysis, live egg imaging, nuclear cloning, oocyte cryopreservation, and nuclear transfer. Highlights include the identification and characterization of Oct-4, germline chromatin silencing by RNAi, cDNA subtraction and cloning in the field of trophoblast/placental development, and selective ablation. There are also methods for PCR-based cloning, differentiating embryonic stem cells into embryonic bodies, live imaging of mammalian embryos using multiphoton microscopy, and the cloning of pig, cattle, rabbit, and mouse oocytes. Each readily reproducible protocol is described in step-by-step detail and contains an introduction outlining the principle behind the technique, lists of equipment and reagents, and tips on troubleshooting and avoiding known pitfalls. An accompanying earlier volume, Sperm and Oocyte Analysis, focuses on sperm cells, oocyte analysis, oocyte maturation, fertilization, and preparation techniques.
Comprehensive and cutting-edge, Germ Cell Protocols offers both novice and established researchers a gold-standard collection of hard-to-find methods for high impact research, diverse procedures that are easy-to-follow, well-illustrated, and allow a cross-species transfer of knowledge from lower vertebrates to higher mammalian systems.