Dynamic Morphology of Leukemia Cells: A Comparative Study by Scanning Electron Microscopy and Microcinematography

مورفولوژی پویا تلاشی است برای مرتبط ساختن معماری سطح و شکل سلول های ثابت، همانطور که توسط میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM)، با رفتار سلول های زنده ثبت شده توسط میکروسینماتوگرافی (MCM) به تصویر کشیده شده است. اگر SEM و MCM به طور همزمان برای تجزیه و تحلیل جمعیت های سلولی استفاده شوند، تفسیر دینامیکی عکس های SEM تنها در صورتی معتبر است که شرایط تجربی برای این دو تکنیک یکسان باشد. این امر با اجازه دادن به سلول‌ها برای نشستن روی سطح شیشه‌ای به دست می‌آید که در آن به اندازه کافی طولانی باقی می‌مانند تا فعالیت‌های مختلف خود را در شرایطی یکسان برای هر دو تکنیک انجام دهند (برای جزئیات فنی به روش‌شناسی مراجعه کنید). تجزیه و تحلیل یک جمعیت مستلزم مطالعه تعداد زیادی سلول است. این پیش نیاز با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی در سطوح کم بزرگنمایی و با استفاده از اتاقک های کشت برای فیلمبرداری برآورده می شود. می‌توان استدلال کرد که بررسی سلول‌های متصل، یک بررسی کامل SEM از یک جمعیت را حذف می‌کند، زیرا سلول‌هایی که از ابتدا نمی‌چسبند یا در طی مراحل مختلف آماده‌سازی جدا نمی‌شوند، از بین می‌روند. برای این کار، سینماتوگرافی یک کنترل قابل اعتماد است: همه انواع سلول‌های شناسایی شده در فیلم‌های تایم لپس در میکروگراف‌های الکترونی روبشی (SE) نیز دیده می‌شوند. اعتراض دیگر و کلی تر به تفسیر پویا مربوط به مصنوعی بودن رفتار سلولی روی شیشه است. این درست است، اما مطالعات مقایسه ای استفاده از این بستر را بی اعتبار نمی کند.

Dynamic Morphology is the attempt to correlate surface architec­ ture and shape of fixed cells, as visualized by scanning electron microscopy (SEM), with the behavior of living cells, recorded by microcinematography (MCM). If SEM and MCM are used concurrently for the analysis of cell populations, a dynamic inter­ pretation of SEM photographs is only valid if the experimental conditions are identical for the two techniques. This is achieved by allowing the cells to settle on a glass surface where they remain long enough to perform their various activities under conditions identical for both techniques (for technical details see Methodology). The analysis of a population necessitates the study of a large number of cells. This prerequisite is met by operating the scanning electron micro­ scope at low levels of magnification, and by using culture chambers for cinematography. It can be argued that the examina­ tion of attached cells excludes a complete SEM survey of a population, as cells not adhering from the outset or becoming detached during the different preparatory steps are lost. For this, cinematography proved to be a reliable control: All cell types recognized in time-lapse films were also seen in scanning electron (SE) micrographs. Another, and more general, objection to a dynamic interpretation concerns the artificiality of cellular behavior on glass. This is true, but does not invalidate compara­ tive studies making use of this substrate.