Antibody Technology

Cover......Page 1
Half Title......Page 2
Title Page......Page 4
Copyright Page......Page 5
Table of Contents......Page 6
Abbreviations......Page 10
Preface......Page 12
  Introduction......Page 14
  Antibodies......Page 15
  Antibody biosynthesis......Page 17
  Manipulation of the immune response......Page 22
   Mode of immunization......Page 23
   Timing of immunizations......Page 24
   Titer......Page 25
   Affinity......Page 28
   Cross-reactivity......Page 31
   Immunoglobulin class......Page 32
   Hapten–carrier protein conjugates......Page 33
   Solid-phase reagents......Page 34
  References......Page 36
  Introduction......Page 38
   Immunization......Page 39
   Myelomas......Page 41
   Fusion......Page 43
   HAT selection......Page 44
   Antibody screening tests......Page 45
   Cloning......Page 46
   Propagation of clones......Page 48
   Alternative lymphocytes......Page 51
   In vitro immunization......Page 52
   Heteromyelomas and hybrid hybridomas......Page 53
   Alternative cloning methods......Page 54
  Making or buying: relative merits......Page 55
  References......Page 57
  Introduction......Page 58
   Antibody fragmentation: Fab and F(ab')2......Page 59
   Bispecific antibodies......Page 61
   Altering effector functions......Page 62
   Humanizing rodent antibodies......Page 63
   Combinatorial antibody gene libraries......Page 65
  Summary and future prospects......Page 75
  References......Page 76
  Immunoprecipitation reactions......Page 78
  Radioimmunoassay......Page 81
   Radioactive labeling......Page 82
   Separation systems......Page 84
  Immunoradiometric assays......Page 85
  Other immunoassay architectures......Page 87
  Nonisotopic immunoassays......Page 88
   Enzyme immunoassay......Page 89
   Fluorescence immunoassay......Page 91
   Chemiluminescence immunoassay......Page 92
   Homogeneous immunoassays......Page 94
  Summary......Page 95
  References......Page 96
  Immunocytochemistry......Page 98
   Tissue and cell preparation......Page 99
   Choice of antibody......Page 101
   Choice of antibody label......Page 102
   Labeling strategies......Page 107
   Double and triple labeling......Page 109
   Nonspecific staining......Page 112
  Immunoblotting......Page 113
  References......Page 115
  Introduction......Page 116
   Polyclonal antisera......Page 117
   Rodent monoclonal antibodies......Page 118
   Humanized and CDR-grafted antibodies......Page 123
   Unlabeled antibodies......Page 124
   Labeled antibodies......Page 125
  Regulatory issues......Page 130
  References......Page 131
  Immunopurification......Page 134
  Biosensors......Page 137
  Catalytic antibodies......Page 139
  Epitope mapping......Page 140
  References......Page 142
 Appendix A: Glossary......Page 144
 Appendix B: Suppliers......Page 148
 Appendix C: Further reading......Page 153
Index......Page 156