Agrobacterium Protocols

Agrobacterium tumefaciens یک باکتری خاک است که بیش از یک قرن است که به عنوان یک پاتوژن عامل بیماری کیسه صفرا تاج گیاه شناخته شده است. برخلاف بسیاری از پاتوژن های دیگر، آگروباکتریوم توانایی رساندن DNA به سلول های گیاهی و تغییر دائمی ژنوم گیاه را دارد. کشف این ویژگی منحصربه‌فرد در 30 سال پیش ابزاری قدرتمند برای تبدیل ژنتیکی گیاهان برای اهداف تحقیقاتی اساسی و توسعه کشاورزی در اختیار دانشمندان علوم گیاهی قرار داده است. در مقایسه با روش‌های تبدیل فیزیکی مانند بمباران ذرات یا الکتروپوراسیون، تحویل DNA با واسطه Agrobacterium دارای تعدادی مزیت است. یکی از ویژگی‌های آن، تمایل آن به تولید تک یا کم تعداد تراریخته‌های یکپارچه با انتهای مشخص است. ادغام یک نسخه تراریخته در ژنوم گیاه احتمال کمتری دارد که باعث "خاموشی ژن" شود که اغلب با درج چندین ژن مرتبط است. هنگامی که اولین نسخه از پروتکل های آگروباکتریوم در سال 1995 منتشر شد، تنها تعداد انگشت شماری از گیاهان را می توان به طور معمول با استفاده از آگروباکتریوم تغییر شکل داد. تبدیل با واسطه باکتری در حال حاضر معمولاً برای معرفی DNA به بسیاری از گونه‌های گیاهی، از جمله گونه‌های گیاهی تک لپه‌ای که قبلاً غیرمیزبان برای آگروباکتریوم در نظر گرفته می‌شدند، استفاده می‌شود. قابل توجه ترین پیشرفت های اخیر است که نشان می دهد آگروباکتریوم می تواند برای رساندن DNA به گونه های غیر گیاهی از جمله باکتری ها، قارچ ها و حتی سلول های پستانداران نیز استفاده شود.

Agrobacterium tumefaciens is a soil bacterium that for more than a century has been known as a pathogen causing the plant crown gall disease. Unlike many other pathogens, Agrobacterium has the ability to deliver DNA to plant cells and permanently alter the plant genome. The discovery of this unique feature 30 years ago has provided plant scientists with a powerful tool to genetically transform plants for both basic research purposes and for agric- tural development. Compared to physical transformation methods such as particle bomba- ment or electroporation, Agrobacterium-mediated DNA delivery has a number of advantages. One of the features is its propensity to generate single or a low copy number of integrated transgenes with defined ends. Integration of a single transgene copy into the plant genome is less likely to trigger “gene silencing” often associated with multiple gene insertions. When the first edition of Agrobacterium Protocols was published in 1995, only a handful of plants could be routinely transformed using Agrobacterium. Ag- bacterium-mediated transformation is now commonly used to introduce DNA into many plant species, including monocotyledon crop species that were previously considered non-hosts for Agrobacterium. Most remarkable are recent devel- ments indicating that Agrobacterium can also be used to deliver DNA to non-plant species including bacteria, fungi, and even mammalian cells.