A Novel Heme-Thiolate Peroxygenase AaeAPO and Its Implications for C-H Activation Chemistry

در این پایان نامه، Xiaoshi Wang به بررسی عملکرد و مکانیسم یک هم-تیولات پراکسیژناز تازه کشف شده، AaeAPO می پردازد. این کلاس آنزیمی از Agrocybe aegerita می آید و در تبدیل هیدروکربن های بی اثر به الکل استفاده می شود. کار شیائوشی بر روی آنزیم P450 خارج سلولی متمرکز است که از نظر پایداری و عدم حلالیت آن محدود نیست و بنابراین برای استفاده گسترده صنعتی مناسب است. نویسنده نشان می دهد که پراکسیژناز طیف وسیعی از واکنش ها را کاتالیز می کند. در برخی موارد نویسنده حتی تبدیل‌های بسیار دشوار در مولکول‌هایی را توصیف می‌کند که بسیار خنثی هستند. تحقیقات دقیق او یک چارچوب مکانیکی برای چگونگی کاتالیز پراکسیژناز چنین تعداد زیادی از واکنش ها فراهم می کند. نکته مهم این پایان نامه، شناسایی واسطه های کلیدی کوتاه مدت در چرخه کاتالیزوری پراکسیژناز، با استفاده از روش های سریع جنبشی و طیف سنجی، و همچنین روشن شدن خواص ترمودینامیکی این واسطه های پر انرژی است. این کار بینش جدیدی را در مورد دسته مهمی از آنزیم ها اضافه می کند.

In this thesis, Xiaoshi Wang investigates the function and mechanism of a newly discovered heme-thiolate peroxygenase, AaeAPO. This enzyme class comes from Agrocybe aegerita and is used in the conversion of inert hydrocarbons to alcohols. Xiaoshi's work focuses on an extracellular P450 enzyme which is not limited in its stability and lack of solubility and therefore is relevant for widespread industrial use. The author demonstrates that the peroxygenase catalyzes a wide range of reactions. In some cases the author even describes very difficult transformations in molecules that are highly inert. Her detailed investigations provide a mechanistic framework for how the peroxygenase catalyzes such a large number of reactions. A major highlight of this thesis is the identification of key short-lived intermediates in the catalytic cycle of the peroxygenase, using rapid kinetic and spectroscopic methods, as well as the elucidation of the thermodynamic properties of these high-energy intermediates. This work adds new insight into an important class of enzymes.